Болезни и вредители медоносных пчел — Акарапидоз — Диагноз

Диагноз ставят на основании результатов лабораторных исследований. Пчел берут весной перед выставкой семей из зимовника или осенью. В пробе должны содержаться только свежие трупы или живые пчелы, взятые с крайних рамок или у леткового отверстия. Пробы берут на благополучных пасеках, не менее 10 % от имеющихся на них семей пчел, а также от неблагополучных семей при подозрении на заболевание.
Нужно систематически исследовать в течение 3-5 лет все семьи неблагополучных пасек и близлежащих.
Поступивших в лабораторию погибших пчел заливают на ночь 10 %-ным раствором щелочи. Живых можно исследовать сразу же, после умерщвления парами эфира или их тоже помещают в раствор щелочи. Затем трупики тщательно промывают в водопроводной воде и сушат на фильтровальной бумаге. Исследования ведут методом индивидуального вскрытия или компрессорной диагностики.
При индивидуальном вскрытии пчелу кладут на спинку в чашку Петри, заливают слоем парафина и укрепляют энтомологическими иглами. Чашку помещают на предметный столик бинокулярного микроскопа МБС-1 или МБС-2, и под контролем глаза препаровальной иглой отчленяют голову вместе с первой парой ног. Обнаруживают оборванные концы первой пары грудных трахей, для выделения их надрывают хитин среднего членика груди и отгибают его в стороны. Обращают внимание на состояние трахей, характерное при поражении акарапидозом: наличие затемнений, отдельных желтых, коричневых пятен, черных распадающихся участков. Отделяют трахею и кладут в каплю воды на предметном стекле, накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом (X 150-200) в слегка затененном поле зрения на наличие клещей.

Метод индивидуального вскрытия пчел имеет ряд модификаций. За рубежом широкое распространение получил метод исследования среза среднегруди. После осторожного удаления головы и передней пары ног делают острыми ножницами или бритвой срез средней части груди пчелы параллельно первому удаленному сегменту, срез должен проходить у основания крыльев. Кусочки укладывают на 24 ч в 10%-ный раствор щелочи при комнатной температуре (или кипятят 4 мин) и после промывки исследуют. Для просветления сильно затемненных трахей используют молочную кислоту или лактофенол.
При массовом исследовании пчел на акарапидоз применяют способ компрессорной диагностики. После удаления головы и передней пары ног содержимое грудной полости выдавливают пинцетом на одну из клеток компрессориума (или укладывают сделанные срезы со средней части груди). После заполнения его проводят микроскопию. Для исследования одной пробы требуется просмотреть два заправленных компрессориума. Недостатком метода является потеря определенного количества трахей при заправке прибора.
В последние годы предложен более совершенный метод диагностики, не уступающий по точности индивидуальному вскрытию. У 100-200 пчел отделяют грудь, удаляют ноги и крылья, материал помещают в контейнеры объемом в 100 мл, заполняют их на 1/2 водой и размельчают роторным ножом в гомогенизаторе (100-10 000 об/мин) 3 раза по нескольку секунд. Полученную суспензию пропускают через сито с размером ячейки 0,8 мм, ополаскивают водой, доводя ее количество до 50 мл. Фильтрат центрифугируют 5 мин при 1500 об/мин, удаляют надосадочную жидкость. К осадку добавляют несколько капель неразведенной молочной кислоты и оставляют на 10 мин для растворения мышечных волокон, а затем микроскопируют.